Osteoarthritis (OA) minangka salah sawijining penyakit sendi balung degeneratif kronis jangka panjang sing mengaruhi populasi umur luwih saka 65 taun.
1]. Umumé, pasien OA didiagnosis karo balung rawan sing rusak, sinovium sing inflamasi, lan kondrosit eroded, sing nyebabake rasa nyeri lan tekanan fisik.
2]. Nyeri artritis utamane disebabake dening degenerasi balung rawan ing sendi kanthi inflamasi, lan nalika balung rawan rusak banget, balung bisa tabrakan siji lan sijine nyebabake rasa nyeri sing ora bisa ditahan lan kesulitan fisik.
3]. Keterlibatan mediator inflamasi kanthi gejala kayata nyeri, bengkak, lan kaku sendi wis didokumentasikan kanthi apik. Ing pasien OA, sitokin inflamasi, sing nyebabake erosi balung rawan lan balung subkondral ditemokake ing cairan sinovial [
4]. Loro keluhan utama sing umume pasien OA yaiku nyeri lan inflamasi sinovial. Mulane, tujuan utama terapi OA saiki yaiku nyuda rasa nyeri lan inflamasi. [
5]. Sanajan perawatan OA sing kasedhiya, kalebu obat non-steroid lan steroid, wis kabukten khasiat kanggo nyuda rasa nyeri lan inflamasi, panggunaan jangka panjang obat kasebut duweni akibat kesehatan sing abot kayata disfungsi kardiovaskular, gastro-intestinal, lan ginjel.
6]. Dadi, obat sing luwih efektif kanthi efek samping sing luwih sithik kudu dikembangake kanggo perawatan osteoarthritis.
Produk kesehatan alami tambah populer amarga aman lan gampang kasedhiya [
7]. Obat-obatan tradisional Korea wis mbuktekake khasiat kanggo sawetara penyakit inflamasi, kalebu arthritis [
8]. Aucklandia lappa DC. dikenal kanthi sifat obat, kayata ningkatake sirkulasi qi kanggo ngilangi rasa nyeri lan nyenengake weteng, lan wis digunakake sacara tradisional minangka analgesik alami [
9]. Laporan sadurunge nuduhake yen A. lappa nduweni anti-inflamasi [
10,
11], analgesik [
12], antikanker [
13], lan gastroprotektif [
14] efek. Maneka warna aktivitas biologis A. lappa disebabake dening senyawa aktif utama: costunolide, dehydrocostus lactone, dihydrocostunolide, costuslactone, α-costol, saussurea lactone lan costuslactone [
15]. Panaliten sadurunge nyatakake yen costunolide nuduhake sifat anti-inflamasi ing lipopolysaccharide (LPS), sing nyebabake makrofag liwat regulasi NF-kB lan jalur protein kejut panas.
16,
17]. Nanging, ora ana panaliten sing nyelidiki aktivitas potensial A. lappa kanggo perawatan OA. Panliten saiki wis nyelidiki efek terapeutik A. lappa marang OA nggunakake (monosodium-iodoacetate) MIA lan model tikus sing diakibatake asam asetat.
Monosodium-iodoacetate (MIA) misuwur digunakake kanggo ngasilake akeh prilaku nyeri lan fitur patofisiologis OA ing kewan.
18,
19,
20]. Nalika disuntikake menyang sendi lutut, MIA ngrusak metabolisme kondrosit lan nyebabake inflamasi lan gejala inflamasi, kayata erosi balung rawan lan subkondral, gejala utama OA [
18]. Respon writhing sing diakibatake karo asam asetat dianggep minangka simulasi nyeri perifer ing kewan ing ngendi nyeri inflamasi bisa diukur kanthi kuantitatif.
19]. Garis sel makrofag tikus, RAW264.7, populer digunakake kanggo nyinaoni respon seluler kanggo inflamasi. Sawise aktivasi karo LPS, makrofag RAW264 ngaktifake jalur inflamasi lan ngetokake sawetara perantara inflamasi, kayata TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS, lan IL-6 [
20]. Panaliten iki wis ngevaluasi efek anti-nociceptive lan anti-inflamasi saka A. lappa marang OA ing model kewan MIA, model kewan sing diinduksi asam asetat, lan sel RAW264.7 sing diaktifake LPS.
2. Materi lan Metode
2.1. Bahan tanduran
ROOT pepe A. lappa DC. digunakake ing eksperimen iki dituku saka Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea). Iki diidentifikasi dening Prof. Donghun Lee, Dept. of Herbal pharmacology, Col. of Korean Medicine, Gachon University, lan nomer spesimen voucer didepositokake minangka 18060301.
2.2. Analisis HPLC saka A. lappa Extract
A. lappa diekstraksi nggunakake apparatus refluks (banyu suling, 3 jam ing 100 °C). Solusi sing diekstrak disaring lan dikondensasi nggunakake evaporator tekanan rendah. Ekstrak A. lappa ngasilake 44,69% sawise beku-pangatusan ing suhu -80 °C. Analisis kromatografi A. lappa dilakokaké karo HPLC disambungake nggunakake 1260 Tanpa watesⅡ HPLC-sistem (Agilent, Pal Alto, CA, USA). Kanggo pamisahan kromatik, kolom EclipseXDB C18 (4.6 × 250 mm, 5 µm, Agilent) digunakake ing 35 °C. Total 100 mg saka spesimen iki diencerke ing 10 ml saka 50% metanol lan sonicated kanggo 10 min. Sampel disaring nganggo saringan syringe (Waters Corp., Milford, MA, USA) 0,45 μm. Komposisi fase seluler yaiku 0,1% asam fosfat (A) lan asetonitril (B) lan kolom diencerake kaya ing ngisor iki: 0-60 min, 0%; 60–65 menit, 100%; 65–67 menit, 100%; 67-72 min, 0% solvent B kanthi laju aliran 1,0 mL / min. Efluen diamati ing 210 nm kanthi volume injeksi 10 μL. Analisis ditindakake kanthi rangkep kaping telu.
2.3. Omah lan Manajemen Kewan
Tikus Sprague-Dawley (SD) lanang umur 5 minggu lan tikus ICR lanang umur 6 minggu dituku saka Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea). Kéwan disimpen ing kamar kanthi suhu konstan (22 ± 2 ° C) lan kelembapan (55 ± 10%) lan siklus cahya / peteng 12/12 jam. Kéwan kasebut kenal karo kondisi kasebut luwih saka seminggu sadurunge eksperimen diwiwiti. Kéwan duwé pakan lan banyu ad libitum. Aturan etika saiki kanggo perawatan lan penanganan kewan ing Universitas Gachon (GIACUC-R2019003) ditindakake kanthi ketat ing kabeh prosedur eksperimen kewan. Panliten iki dirancang kanggo nyoba paralel lan investigator-blinded. Kita ngetutake metode euthanasia miturut pedoman Komite Etika Eksperimen Kewan.
2.4. Injeksi lan Perawatan MIA
Tikus dipérang dadi 4 klompok kanthi acak, yaiku sham, kontrol, indometasin, lan A. lappa. Dibius nganggo campuran 2% isofluorane O2, tikus disuntikake kanthi nggunakake 50 μL MIA (40 mg / m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) intra-artikular menyang sendi lutut kanggo nyebabake OA eksperimental. Pangobatan ditindakake kaya ing ngisor iki: kelompok kontrol lan palsu mung dikelola kanthi diet dhasar AIN-93G. Mung, klompok indomethacin diwenehake karo indomethacin (3 mg / kg) sing digabungake menyang diet AIN-93G lan klompok A. lappa 300 mg / kg ditugasake kanggo diet AIN-93G ditambah karo A. lappa (300 mg / kg). Pangobatan kasebut diterusake sajrone 24 dina wiwit dina induksi OA kanthi tingkat 15-17 g saben bobot awak 190-210 g saben dina.
2.5. Pengukuran Weight Bearing
Sawise induksi OA, pangukuran kapasitas beban bobot awak mburi tikus ditindakake kanthi incapacitance-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) kaya sing dijadwalake. Distribusi bobot ing sikil mburi diitung: kapasitas dukung bobot (%)
